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Discovery History and Structural Features of Antibody

Release date:2021-06-16


抗體(Antibody)這個(gè)詞首次出現(xiàn)在保羅·埃爾利希1891年10月公布的《免疫力的試驗(yàn)性研究》這篇文章中,德語的抗體“Antik?rper”出現(xiàn)在該文章的結(jié)論部分。其中指出了“如果兩種物質(zhì)導(dǎo)致兩種不同抗體的產(chǎn)生,那么這兩種物質(zhì)必然是不同的”。然而這一術(shù)語并沒有立即被接受,還有被建議使用的其它幾個(gè)術(shù)語,如:免疫體(Immunk?rper)、介體受體(Amboceptor)、介體(Zwischenk?rper)、物質(zhì)敏感體(substance sensibilisatrice)、連接體(copula)、德氏體(Desmon)、白細(xì)胞素(philocytase)、介體固定體(fixateur)以及免疫素(Immunisin)等??贵w和抗毒素(Antitoxin)字面結(jié)構(gòu)相似,概念則和免疫體(Immunk?rper)類似。




根據(jù)E. Padlan公布的抗體結(jié)構(gòu)圖,朱利·安沃斯-安德烈*為斯克里普斯研究所佛羅里達(dá)分部創(chuàng)作了雕塑《西方天使》(2008年)塑像仿照列奧納多·達(dá)·芬奇的維特魯威人,將抗體放置到一個(gè)圓環(huán)的中間,寓意其對于人類的重要意義。


針對抗體的研究始于1890年,埃米爾·阿道夫·馮·貝林及北里柴三郎首次描述了抗體對白喉及破傷風(fēng)痙攣毒素的抵抗作用。他們兩人將體液免疫理論往前推進(jìn)了一步,提出了血清中存在一種可以與外來抗原相反應(yīng)的某種介質(zhì)的假設(shè)。保羅·埃爾利希受到了他們的這一想法的啟發(fā),于1897年提出了抗體與抗原互動(dòng)的側(cè)鏈理論假說。他假設(shè)道,在細(xì)胞的表面存在能和特定毒素發(fā)生一把鑰匙對應(yīng)一把鎖類似的特異結(jié)合作用的感受器,而結(jié)合反應(yīng)則會(huì)進(jìn)一步導(dǎo)致相關(guān)抗體的生產(chǎn)。其他研究人員在之后的研究中認(rèn)為,抗體可以在血液中穩(wěn)定獨(dú)立存在。在1904年,奧姆羅斯·萊特進(jìn)一步提出通過可溶性抗體在細(xì)菌的表面包裹標(biāo)識(shí),使其成為吞噬作用的目標(biāo),并最終被消滅。這一過程被他命名為調(diào)理作用。


到了二十世紀(jì)二十年代,邁克爾·海德堡和奧斯瓦爾德·埃弗里觀察到抗原可以被抗體所凝結(jié),并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)抗體是一種蛋白質(zhì)。在三十年代,約翰·馬拉克對抗原-抗體結(jié)合活動(dòng)的生物化學(xué)性質(zhì)做了更詳盡的實(shí)驗(yàn)。接下來的一次重大突破發(fā)生在四十年代,萊納斯·鮑林通過抗體抗原的互動(dòng)能力取決于各自的形狀而不是其化學(xué)成分,證明了埃爾利希所提出的一把鑰匙配一把鎖的免疫學(xué)理論。1948年,阿斯特麗德·法戈瑞奧司發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞的其中一種形式漿細(xì)胞就是負(fù)責(zé)生產(chǎn)抗體的工廠。


此后,研究工作的重點(diǎn)轉(zhuǎn)向了識(shí)別抗體蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中各部分的作用。二十世紀(jì)六十年代,杰拉爾德·埃德爾曼和約瑟夫·蓋里發(fā)現(xiàn)了抗體的輕鏈,并且發(fā)現(xiàn)這和1845年由亨利·本冊·瓊斯所發(fā)現(xiàn)的本周氏蛋白質(zhì)是同一種物質(zhì),這是一項(xiàng)重大的突破。緊接著,埃德爾曼在進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)抗體中的重鏈和輕鏈?zhǔn)怯呻p硫鍵連接在一起的。與此同時(shí),羅德尼·羅伯特·波特識(shí)別出了免疫球蛋白的抗體結(jié)合區(qū)(Fab)及抗體尾部的可結(jié)晶區(qū)。根據(jù)這些發(fā)現(xiàn),科學(xué)家們對免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了推測,并描述了IgG蛋白質(zhì)的完整氨基酸序列。


以上這些發(fā)現(xiàn),使得他們被共同授予1972年的諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。Fv區(qū)則由戴維·吉沃爾(David Givol)所首先制備和識(shí)別。正當(dāng)人們對抗體的大多數(shù)早期研究還集中在IgM和IgG上時(shí),六十年代還發(fā)生了重要的事情:托馬斯·托馬西發(fā)現(xiàn)了屬于新種型的分泌形態(tài)IgA抗體,戴維·S·羅維和約翰·L·費(fèi)伊則識(shí)別出了IgD,石坂公成和石坂照子夫婦則共同發(fā)現(xiàn)了與過敏反應(yīng)有關(guān)的抗體種型IgE。1976年,利根川進(jìn)對免疫球蛋白相關(guān)基因進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)了抗體通過基因重排實(shí)現(xiàn)多樣性的體細(xì)胞超突變基本原理。


抗體的結(jié)構(gòu)特征
1


抗體,又稱為免疫球蛋白(immunoglobulin,簡稱Ig),是一種主要由漿細(xì)胞分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等病原體的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w能通過其可變區(qū)唯一識(shí)別特定外來物的一個(gè)獨(dú)特特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原(Antigen)。蛋白上Y形的其中兩個(gè)分叉頂端都有一被稱為互補(bǔ)位(抗原結(jié)合位)的鎖狀結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)僅針對一種特定的抗原表位。這就像一把鑰匙只能開一把鎖一般,使得一種抗體僅能和其中一種抗原相結(jié)合。 抗體和抗原的結(jié)合完全依靠非共價(jià)鍵的相互作用,這些非共價(jià)鍵的相互作用包括氫鍵、范德華力、電荷作用和疏水作用。這些相互作用可以發(fā)生在側(cè)鏈或者多肽主干之間。正因這種特異性的結(jié)合機(jī)制,抗體可以“標(biāo)記”外來微生物以及受感染的細(xì)胞,以誘導(dǎo)其他免疫機(jī)制對其進(jìn)行攻擊,又或直接中和其目標(biāo),例如通過與入侵和生存至關(guān)重要的部分相結(jié)合而阻斷微生物的感染能力等。針對不同的抗原,抗體的結(jié)合可能阻斷致病的生化過程,或者召喚巨噬細(xì)胞消滅外來物質(zhì)。而抗體能夠與免疫系統(tǒng)的其它部分交互的能力,是通過其Fc區(qū)底部所保留的一個(gè)糖基化座實(shí)現(xiàn)的。體液免疫系統(tǒng)的主要功能便是制造抗體。抗體也可以與血清中的補(bǔ)體一起直接破壞外來目標(biāo)。


抗體是一種高分子球狀血液蛋白質(zhì),重量約為150kDa。由于在部分氨基酸殘基中含有糖鏈,抗體也是一種糖蛋白。能發(fā)揮功能的基本單位是一個(gè)免疫球蛋白單體。在分泌形態(tài)的抗體中包括:二聚體IgA、真骨附類魚的四聚體IgM以及哺乳動(dòng)物的五聚體IgM。


多種免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域構(gòu)成了抗體的兩條重鏈(紅色和藍(lán)色部分),以及兩條輕鏈(綠色和黃色)。這些結(jié)構(gòu)域包含7次(恒定區(qū))及9次(變化區(qū))的β折疊。可發(fā)生變化的部分稱為V區(qū)(或變化區(qū)、可變區(qū)),而不變的部分稱為C區(qū)(或恒定區(qū))。


免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域
2

抗體的單體是一個(gè)Y形的分子,有4條多肽鏈組成。其中包括兩條相同的重鏈,以及兩條相同的輕鏈,之間由雙硫鍵連接在一起。每一條鏈均由稱為免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的多個(gè)結(jié)構(gòu)域所組成。每一個(gè)結(jié)構(gòu)域大約包含70至110個(gè)氨基酸,并根據(jù)大小和功能分門別類。例如可變域IgV以及恒定域IgC。它們的折疊方式很特別:通過兩次β折疊將另一條鏈卷入其中形成三明治狀,互相之間通過半胱氨酸和其它帶電荷氨基酸緊密結(jié)合。


重鏈
3


哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白重鏈有5種,分別用希臘字母記為:α、δ、ε、γ以及μ。根據(jù)重鏈類型的不同,抗體被分為不同的種型,它們被發(fā)現(xiàn)依序分別存在于抗體IgA、IgD、IgE、IgG以及IgM中。不同的重鏈其大小和組成各不相同:α和γ大約有450個(gè)氨基酸組成,而μ和ε大約有550個(gè)氨基酸組成。


1. 抗原結(jié)合區(qū)(Fab)

2. 抗原結(jié)晶區(qū)(Fc)

3. 藍(lán)色的重鏈有一個(gè)可變區(qū)(VH),緊隨其后的一個(gè)恒定區(qū)(CH1),一個(gè)樞紐區(qū),以及另兩個(gè)恒定區(qū)(CH2 and CH3)組成

4. 綠色的輕鏈包含一個(gè)可變區(qū)(VL)以及一個(gè)恒定區(qū)(CL)

5. 抗原結(jié)合點(diǎn)

6. 樞紐區(qū).


在鳥類的血液和蛋清中,還發(fā)現(xiàn)了被稱為IgY的血清抗體種型。這種抗體種型和哺乳動(dòng)物的IgG有很大的區(qū)別。然而在一些舊資料,甚至是生命科學(xué)商業(yè)產(chǎn)品的網(wǎng)站上,仍然稱之為IgG。這是錯(cuò)誤的,并且容易引起混淆。

每一條重鏈有兩個(gè)區(qū)域:恒定區(qū)與可變區(qū)。同種型的抗體,其恒定區(qū)都是一樣的,但不同種型之間該區(qū)域是不相同的。例如:γ、α以及δ型重鏈由三個(gè)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域串聯(lián)而成,并且還有一個(gè)用于增加彈性的鉸鏈區(qū);而μ及ε型重鏈則包括四個(gè)免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域。不同B細(xì)胞所生產(chǎn)抗體的重鏈可變區(qū)是不同的,但是同一個(gè)B細(xì)胞及其克隆體所生產(chǎn)的不同種型抗體的可變區(qū)則是完全相同的。重鏈的可變區(qū)由一個(gè)結(jié)構(gòu)域組成,包含大110個(gè)氨基酸。


輕鏈
4


免疫球蛋白輕鏈由大約211至217個(gè)氨基酸組成,分為兩個(gè)結(jié)構(gòu)域,分別是恒定區(qū)和可變區(qū)。哺乳動(dòng)物的輕鏈有兩種,分別命名為λ(lambda)和κ(kappa)。每一個(gè)抗體的兩個(gè)輕鏈的恒定區(qū)永遠(yuǎn)是完全相同的,例如對于哺乳動(dòng)物而言,同一個(gè)抗體要么是λ型,要么是κ,不會(huì)同時(shí)存在。在如軟骨魚綱(鯊魚)及真骨下綱的低級脊椎動(dòng)物中,還可發(fā)現(xiàn)其它類型的輕鏈,如ι(iota)型。


CDRs、Fv、Fab以及Fc結(jié)構(gòu)域
5


抗體的某些部分具有獨(dú)特的功能。比如說Y形的臂區(qū),包含了兩個(gè)可以結(jié)合抗原的位點(diǎn),是識(shí)別外來物的關(guān)鍵所在。該區(qū)域被稱為Fab區(qū),即抗原結(jié)合區(qū)段(fragment, antigen binding)。無論是重鏈還是輕鏈,抗原結(jié)合區(qū)段均包括一個(gè)可變區(qū)與一個(gè)恒定區(qū),其中可變區(qū)的互補(bǔ)位成型于抗體單體氨基酸鏈的末端??勺儏^(qū)又被稱為Fv區(qū),是與抗體結(jié)合的最關(guān)鍵區(qū)域,無論是輕鏈還是重鏈都包含該區(qū)域。實(shí)際上可變區(qū)的變化并非隨機(jī)或者均勻散布的。更具體的說,這些變化分布在三個(gè)可變的β折疊-轉(zhuǎn)角上,該區(qū)域被稱為互補(bǔ)決定區(qū)(Complementarity Determining Region,CDR),也叫做高變區(qū)。在免疫網(wǎng)絡(luò)理論中,每個(gè)抗體的互補(bǔ)決定區(qū)又被稱為獨(dú)特型或者基因型。適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的適應(yīng)過程,就是依靠有各個(gè)獨(dú)特型之間的互動(dòng)來進(jìn)行調(diào)整的。


Y形結(jié)構(gòu)的基座的作用是調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的活動(dòng),該區(qū)域被稱為Fc區(qū)(Fragment crystallizable region,可結(jié)晶區(qū)域片段),由兩條重鏈組成。根據(jù)抗體類型不同,該區(qū)域的每一條重鏈由2個(gè)或者3個(gè)恒定結(jié)構(gòu)域組成。因此,F(xiàn)c區(qū)可通過與特定類型的Fc感受器,或者其它免疫分子如補(bǔ)體蛋白質(zhì)相結(jié)合,來確保每個(gè)抗體可對一特定抗原產(chǎn)生一個(gè)正確的免疫應(yīng)答。通過這一過程,可引發(fā)不同的生理學(xué)效果,包括識(shí)別調(diào)理顆粒、細(xì)胞溶解,以及肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞的脫顆粒過程。

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參閱文獻(xiàn):

1.Rhoades RA, Pflanzer RG (2002). Human Physiology (4th ed.). Thomson Learning. p. 584. ISBN 0-534-42174-1.

2.Charles Janeway (2001). Immunobiology. (5th ed.). Garland Publishing. ISBN 0-8153-3642-X. (electronic full text via NCBI Bookshelf)

3. Pier GB, Lyczak JB, Wetzler LM (2004). Immunology, Infection, and Immunity. ASM Press. ISBN 1-55581-246-5.

4.Borghesi L, Milcarek C (2006). "From B cell to plasma cell: regulation of V(D)J recombination and antibody secretion". Immunol. Res. 36 (1–3): 27–32. doi:10.1385/IR:36:1:27. PMID 17337763

5.參考資料:https://en.wikipedia.org/wiki/Antibody


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